学术论文

      正交设计优化硬叶兜兰SSR-PCR反应体系

      Study on Optimization of SSR-PCR Reaction System on P .micranthumby Orthogonal Design

      摘要:
      以构建珍稀物种硬叶兜兰SSR-PCR反应体系,采取正交设计试验对硬叶兜兰SSR体系组分中的Mg2+、基因组DNA、DNA Taq聚合酶、dNTPs、引物5个因素在4个不同程度上进行了组合试验,之后对反应体系中该引物的退火温度在梯度PCR仪上筛选,并进行了最优体系的验证.试验结果显示:体积为10μL的PCR管中最优组合为:模板DNA 20 ng,Mg2+3.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,引物0.8μmol/L,Taq酶0.8 U,10×buffer(Mg2+Free)1μL,引物PR710的退火温度为59.6℃,说明该体系具有较好的实用性.
      Author: Zheng Zhidian Zhang Luoxia Li Zongyan
      作者单位: 西南林业大学 园林学院,云南 昆明,650224
      刊 名: 绿色科技
      年,卷(期): 2017, (21)
      分类号: S682
      在线出版日期: 2017年12月21日
      基金项目: 云南省高校优势特色生态学重点学科建设项目