学术论文

      FISH-FCM方法检测酵母-细菌二元体系中微生物数量

      Simultaneous enumeration of yeasts and bacteria in binary samples by FISH FCM

      摘要:
      以废水生物处理系统和生物发酵系统出现的酵母细菌二元体系作为研究对象,探讨了二元体系生物样品的最佳超声分散条件以及同时检测酵母和细菌数量时荧光原位杂交(FISH) 流式细胞术(FCM)技术的测量精度.染色 FCM检测表明:同时适用于混合酵母样品(酵母假菌丝)和混合细菌样品(活性污泥絮体)的最佳超声分散条件为100 W 、60~90 s,但过强超声条件(120 s)对酵母Candida tropicalis纯培养物(或细菌Escherichia coli纯培养物)的超声粉碎效果完全不同于混合酵母样品(或混合细菌样品).在此基础上,以C. tropicalis和E. coli分别作为酵母和细菌的模式微生物,采用双探针杂交的FISH FCM技术检测了背景微生物(C. tropicalis或E. coli)浓度为107个/ml时二元体系中目标微生物(102~107个/ml)的数量.流式细胞仪能够明显区分噪音和二元体系中的酵母和细菌,因而一次进样时能够同时分析两种微生物数量,并且目标微生物浓度可以精确到104个/ml,此时微生物含量仅为0.1%,其中细菌浓度甚至可以精确到103个/ml(相应含量仅为0.01%).然而,当二元体系中目标微生物浓度过低时(<104 个酵母/ml或<104 个细菌/ml),背景微生物的存在会严重影响FISH FCM技术的测量准确性.
      Author: ZHANG Yan-Yan CHEN Jin-Jun ZHENG Shao-Kui
      作者单位: 北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室,北京,100875
      刊 名: 生态学报 ISTICPKU
      年,卷(期): 2008, 28(10)
      分类号: Q143 Q145 Q93-33
      机标分类号: R28 TS2
      在线出版日期: 2009年1月14日
      基金项目: 国家重点基础研究发展计划(973计划)